Elektroforese wat het is, waar het voor is en hoe het wordt gedaan

Elektroforese is een laboratoriumtechniek die wordt uitgevoerd om moleculen te scheiden op basis van hun grootte en elektrische lading, zodat de diagnose van ziekten kan worden gesteld, eiwitexpressie kan worden geverifieerd of micro-organismen kunnen worden geïdentificeerd.

Elektroforese is een eenvoudige en goedkope procedure, die wordt gebruikt in laboratoriumroutines en in onderzoeksprojecten. Afhankelijk van het doel van de elektroforese, kan het nodig zijn om andere tests en examens uit te voeren om een diagnose te bereiken, bijvoorbeeld.

Waar is het voor

Elektroforese kan voor verschillende doeleinden worden uitgevoerd, zowel in onderzoeksprojecten als in diagnose, omdat het een eenvoudige en goedkope techniek is. Zo kan elektroforese worden uitgevoerd om:

Identificeer virussen, schimmels, bacteriën en parasieten, waarbij deze toepassing vaker voorkomt in onderzoeksprojecten;
Vaderschapstest;
Controleer de expressie van eiwitten;
Identificeer mutaties, bijvoorbeeld nuttig bij de diagnose van leukemie;
Analyseer de soorten circulerend hemoglobine, nuttig bij de diagnose van sikkelcelanemie;
Beoordeel de hoeveelheid eiwitten in het bloed.

Afhankelijk van het doel van de elektroforese, kan het voor de arts nodig zijn om andere aanvullende tests uit te voeren om de diagnose te voltooien.

Hoe het wordt gedaan

Om de elektroforese uit te voeren, is de gel nodig, die afhankelijk van het doel polyacrylamide of agarose kan zijn, elektroforesebuffer en vat, molecuulgewichtmarkering en een fluorescerende kleurstof, naast een UV- of LED-lichtapparatuur, ook bekend als transilluminator.

Na het voorbereiden van de gel moet een specifiek object worden geplaatst zodat de putjes in de gel worden gemaakt, in de volksmond de kam genoemd, en de gel laten uitharden. Wanneer de gel klaar is, breng je de stoffen gewoon aan op de putjes. Hiervoor moet in een van de putjes een molecuulgewichtsmarkering worden geplaatst, een positieve controle, dat is de stof waarvan bekend is wat het is, een negatieve controle, die de validiteit van de reactie en de te analyseren monsters garandeert. Alle monsters moeten worden gemengd met een fluorescerende kleurstof, omdat het op deze manier mogelijk is om de banden op de transilluminator te visualiseren.

De gel met de monsters moet in het elektroforesevat worden geplaatst, dat de specifieke bufferoplossing bevat, en vervolgens wordt het apparaat ingeschakeld zodat er elektrische stroom is en dus potentiaalverschil, wat belangrijk is voor de scheiding deeltjes op basis van hun lading en grootte. De elektroforetische looptijd varieert afhankelijk van het doel van de procedure en kan tot 1 uur duren.

Na de vastgestelde tijd is het mogelijk om het resultaat van de elektroforetische run door de transilluminator te bekijken. Wanneer de gel onder UV- of LED-licht wordt geplaatst, is het mogelijk om het bandpatroon te visualiseren: hoe groter het molecuul, hoe kleiner de migratie, hoe dichter bij de put, hoe lichter het molecuul, hoe groter het migratiepotentieel.

Om de reactie te valideren, is het noodzakelijk dat de banden van de positieve controle worden gevisualiseerd en dat bij de negatieve controle niets wordt gevisualiseerd, omdat anders een indicatie is dat er sprake was van besmetting en het hele proces moet worden herhaald.

Soorten elektroforese

Elektroforese kan voor verschillende doeleinden worden uitgevoerd en, afhankelijk van het doel, kunnen verschillende soorten gel worden gebruikt, de meest voorkomende zijn polyacrylamide en agarose.

Elektroforese om micro-organismen te identificeren komt vaker voor in onderzoekslaboratoria, maar voor diagnostische doeleinden kan elektroforese worden gebruikt om hematologische ziekten en ziekten te identificeren die evolueren met de toename van de hoeveelheid eiwitten, aangezien dit de belangrijkste soorten elektroforese zijn :

1. Hemoglobine-elektroforese

Hemoglobine-elektroforese is een laboratoriumtechniek die wordt uitgevoerd om de verschillende soorten hemoglobine die in het bloed circuleren te identificeren, waardoor de aanwezigheid van ziekten die verband houden met hemoglobinesynthese kan worden geïdentificeerd. Het type hemoglobine wordt geïdentificeerd door middel van elektroforese bij een specifieke pH, idealiter tussen 8,0 en 9,0, waarbij een patroon van banden wordt geverifieerd dat kan worden vergeleken met het normale patroon, waardoor de aanwezigheid van abnormale hemoglobines kan worden geïdentificeerd.

Waar is het voor gemaakt: Hemoglobine-elektroforese wordt uitgevoerd om ziekten te onderzoeken en te diagnosticeren die verband houden met hemoglobinesynthese, zoals sikkelcelanemie en hemoglobine C-ziekte, en is daarnaast nuttig bij het differentiëren van thalassemie. Leer hoe u hemoglobine-elektroforese interpreteert.

2. Eiwitelektroforese

Eiwitelektroforese is een door de arts aangevraagd onderzoek om de hoeveelheid eiwitten die in het bloed circuleren te beoordelen en zo ziekten te identificeren. Deze test wordt gedaan uit een bloedmonster dat wordt gecentrifugeerd om het plasma te verkrijgen, het deel van het bloed dat onder andere bestaat uit eiwitten.

Na elektroforese kan een patroon van banden worden gevisualiseerd en vervolgens een grafiek waarin de hoeveelheid van elke fractie eiwitten wordt aangegeven, wat essentieel is voor de diagnose.

Waar is het voor gemaakt: Met proteïne-elektroforese kan de arts het optreden van multipel myeloom, uitdroging, cirrose, ontsteking, leverziekte, pancreatitis, lupus en hypertensie onderzoeken volgens het bandpatroon en de grafiek in het onderzoeksrapport.

Begrijp hoe het wordt gedaan en hoe u het resultaat van eiwitelektroforese kunt begrijpen.